شناسایی آنتی ژن اختصاصی کیست هیداتیک توسط روش وسترن بلاتینگ به منظور کاربرد تشخیصی

Authors

شاهین فکور

shahin fakour clinical science dept., islamic azad university, sanandaj branch, sanandaj, iranگروه علوم بالینی دانشکده دامپزشکی دانشگاه آزاد اسلامی سنندج، سنندج، ایران بهنام مشکی

behnam meshki biotechnology dept., tehran university, tehran, iranگروه پاتوبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

abstract

چکیده زمینه و هدف: با توجه به اهمیت بیماری هیداتیدوز در جمعیت های انسانی و دامی، بررسی حاضر با هدف شناسایی آنتی ژن تشخیصی کیست هیداتیک با استفاده از روش ایمونوبلاتینگ انجام گرفت. روش بررسی: بدین منظور بعد از تهیه کیست هیداتیک گوسفندی، چهار نوع آنتی ژن مایع خام، مایع جوشانده، آنتی ژن هموژنیزه پروتواسکولکس و آنتی ژن دیواره کیست هیداتیک تهیه گردید. نمونه های سرمی مثبت و عاری از آلودگی در بازرسی کشتارگاهی تهیه شد. الکتروفورز پادگن ها توسط روش (sds-page) با استفاده از سیستم ژل ناپیوسته با ژل جداکننده به غلظت 12% و ژل متراکم کننده به غلظت 5% در مجاورت نشاندار با وزن مولکولی مشخص صورت گرفت. در استفاده از روش وسترن بلاتینگ برای شناسایی پادگن اختصاصی، یک ورقه از غشا نیتروسلولز بر روی ژل انتقال یافت و تحت الکتروفورز قرار گرفت. بعد از انتقال پروتئین ها به غشا نیتروسلولز از شیر خشک بدون چربی بعنوان بافر مسدودکننده و سپس بترتیب از آنتی بادی اولیه و ثانویه و از سوبسترای دی آمینو بنزیدین جهت مشخص شدن باندهای اختصاصی استفاده شد. یافته ها: بررسی نتایج الگوی الکتروفورتیک چهار آنتی ژن تهیه شده از کیست هیداتیک نشان داد در آنتی ژن خام مایع کیست 9 باند پروتئینی از 14 تا بیش از 116 کیلو دالتون وجود دارد که در بین آنها چهار باند با وزن مولکولی 18، 23، 40 و 64 کیلو دالتون مشخص تر و مشترک با پادگن مایع جوشانده هستند. در الکتروفورز آنتی ژن دیواره 9 باند از 14 تا بیش از 116 کیلو دالتون و در پروتواسکولکس 10 باند پروتئینی با وزن مولکولی بیشتر از 35 کیلو دالتون وجود داشت. نتیجه گیری: در ایمونوبلاتینگ آنتی ژن مایع خام یک باند پروتئینی با وزن مولکولی 35 و در آنتی ژن دیواره کیست 3 باند 30، 33 و 46 کیلو دالتون بعنوان آنتی ژنهای اختصاصی شناسایی شدند. کلید واژه ها: کیست هیداتیک، آنتی ژن، وسترن بلاتینگ. وصول مقاله: 1/5/88 اصلاح نهایی: 15/6/88 پذیرش مقاله: 19/6/88

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژنB و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک با استفاده از روش دات بلاتینگ

Introduction & Objective : Hydatidosis, a disease caused by the cestod helminth echinococcus granulosus, is one of the most important parasitic zoonosis in man and a variety of animals. Sensitive and reliable serologic methods are necessary to confirm the diagnosis. In this study, Ag B and Psc Ag were purified as two specific parasitic antigens and evaluated by Dot blotting used on the serum of...

full text

بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژنb و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک با استفاده از روش دات بلاتینگ

مقدمه و هدف : بیماری کیست هیداتیک یکی از مهمترین زئونوزهای انگلی است که در مناطق مختلف دنیا از جمله ایران شیوع دارد. استفاده از روش های سرولوژیکی که بتواند با حساسیت و ویژگی بالا یی در تشخیص هیداتیدوز بکار رود ارزشمند می باشد. از این رو در این پژوهش ، آنتی ژن b و آنتی ژن پروتواسکولکس بعنوان دو آنتی ژن اختصاصی انگل، تخلیص شده و سپس با تست دات بلاتینگ با سرم بیماران هیداتیدوزی و غیر هیداتیدوزی مو...

full text

مطالعه وسترن بلاتینگ آنتی ژنهای پروتئینی سوماتیک فوزاریوم سولانی

چکیده مقدمه: الگوی وسترن بلاتینگ آنتی ژنهای پروتئینی عصاره های سوماتیک قارچها در تشخیص گونه و سویه های آنها مفید بوده و می تواند کمک با ارزشی در تشخیص عامل عفونت باشد. این مطالعه به منظور تعیین الگوی آنتی ژنهای پروتئینی عصاره سوماتیک فوزاریوم سولانی انجام شد. مواد و روش ها : در این مطالعه سویه 7419 UAMH و 3317 UAMH فوزاریوم سولانی که اولی از بیمار و دومی از هوا جدا شده بود جهت بررسی الگوی آ...

full text

بررسی اثر آنتی ژن های پروتواسکولکس کیست هیداتیک بر پیشگیری از رشد کیست های هیداتیک ثانویه

چکیده: مقدمه و هدف: کیست هیداتیک در احشاء داخلی انسان و بعضی حیوانات مستقر می شود و یک مشکل بهداشتی ـ دامپزشکی و اقتصادی در مناطق آلوده تلقی می گردد. هنگامی که این کیست پاره می شـــود پروتواسکولکس های داخل آن ممکن است به خارج راه یافته و داخل بافت میزبان ایجاد کیست های جدیدی موسوم به کیست ثانویه بنمایند. در این راستا ایــــن مطالعه به منظور تعیین تأثیر آنتی ژن های پروتواسکولکس کیست هیداتیک بر پ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان

جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۱۴-۲۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023